Zestaw czynnika martwicy nowotworu szczura Alpha Elisa dla studzienek Tnf Alpha 48

Szczur Czynnik martwicy nowotworu α,Cachektyna,TNF,TNFSF2,TNF-α ZESTAW ELISA

Materiały dostarczone z zestawem

Zasada

Ten zestaw ELISA wykorzystuje metodę Sandwich-ELISA.Dostarczona w tym zestawie płytka Microelisa została wstępnie pokryta przeciwciałem specyficznym dla:TNF-α.Standardy lub próbki są dodawane do odpowiednich studzienek płytki Microelisa i łączone ze specyficznym przeciwciałem.Następnie przeciwciało skoniugowane z peroksydazą chrzanową (HRP) swoiste dlaTNF-αdodaje się do każdego dołka płytki paskowej Microelisa i inkubuje.Wolne składniki są wypłukiwane.Do każdego dołka dodaje się roztwór substratu TMB.Tylko te studnie, które zawierająTNF-αoraz przeciwciało trombomoduliny sprzężone z HRP będą miały kolor niebieski, a następnie zmienią kolor na żółty po dodaniu roztworu zatrzymującego reakcję.Gęstość optyczną (OD) mierzy się spektrofotometrycznie przy długości fali 450 nm.Wartość OD jest proporcjonalna do stężeniaTNF-α.Możesz obliczyć stężenieTNF-αw próbkach, porównując OD próbek z krzywą standardową.

Uwagi:

• Po otrzymaniu zestaw należy przechowywać w temperaturze 4°C. Przed wykonaniem testu zestaw należy doprowadzić do temperatury pokojowej.Usuń wszelkie niepotrzebne paski z płytki pokrytej przeciwciałem TNF-α, zamknij je ponownie folią zip-lock i przechowuj w temperaturze 4°C.
• W stężonym buforze myjącym mogą pojawić się osady.Proszę podgrzać bufor, aby rozpuścić wszystkie osady, co nie wpłynie na wyniki.
• Aby uniknąć błędu eksperymentalnego, należy używać dokładnej pipety.Próbki należy dodać do mikropłytki w czasie krótszym niż 5 minut.Jeśli dołączona jest duża liczba próbek, zalecana jest pipeta wielokanałowa.
• W każdym teście należy uwzględnić krzywą standardową.Zaleca się powielenie studzienek.Jeśli wartość OD próbki jest większa niż pierwsza studzienka standardów, przed testem należy rozcieńczyć próbkę (n razy).Przy obliczaniu pierwotnego stężenia trombomoduliny należy pomnożyć całkowity współczynnik rozcieńczenia (XnX5).
• Aby uniknąć zanieczyszczenia krzyżowego, uszczelniacze Microplate są przeznaczone wyłącznie do jednorazowego użytku.
• Proszę trzymać Substrat z dala od światła.
• Wszystkie operacje powinny być ściśle zgodne z instrukcjami producenta.Wyniki określone przez czytnik płytek mikrotitracyjnych.
• Wszystkie próbki, bufor płuczący i odpady należy traktować jako czynniki zakaźne.
• Nie należy mieszać odczynników z różnych partii.

Znane stężenia standardu TNF-α i odpowiadające mu odczyty OD wykreślono odpowiednio na skali logarytmicznej (oś x) i skali logarytmicznej (oś y).Stężenie TNF-α w próbce określa się przez wykreślenie OD próbki na osi Y.Pierwotne stężenie oblicza się mnożąc współczynnik rozcieńczenia.