Szybki test na antygen wirusa Ebola to szybki, serologiczny test immunologiczny z chromatografią z przepływem bocznym, służący do jakościowego wykrywania antygenów
z wirusów Ebola w próbkach ludzkiej krwi pełnej, surowicy lub osocza jako pomoc w diagnozowaniu zakażenia wirusem Ebola.
STRESZCZENIE
Wirus Ebola powoduje ostrą, poważną chorobę, która nieleczona często kończy się śmiercią. Choroba wirusowa Ebola (EVD) pojawiła się po raz pierwszy w 1976 r
jednoczesne ogniska, jedna w Nzara w Sudanie, a druga w Yambuku w Demokratycznej Republice Konga. To ostatnie miało miejsce w r
wioska nad rzeką Ebola, od której wzięła się nazwa tej choroby.
Mikrografie elektronowe przedstawicieli rodzaju Ebolavirus pokazują, że mają one charakterystyczną nitkowatą strukturę filowirusa. EBOV
VP30 ma długość około 288 aminokwasów. Wiriony mają ogólnie formę rurkową, ale ogólny kształt jest zmienny i mogą wyglądać jak
klasyczny łuk pasterski lub śruba oczkowa, w kształcie litery U lub 6, lub zwinięty, okrągły lub rozgałęziony; techniki laboratoryjne, takie jak wirowanie, mogą
być źródłem niektórych z tych formacji. Wiriony mają na ogół średnicę 80 nm i dwuwarstwę lipidową zakotwiczającą glikoproteinę
wyrzuca ze swojej powierzchni kolce o długości od 7 do 10 nm. Mają zmienną długość, zwykle około 800 nm, ale mogą mieć długość do 1000 nm.
W centrum wirionu znajduje się struktura zwana nukleokapsydem, która jest utworzona przez spiralnie nawinięty wirusowy genomowy RNA skompleksowany z
białka NP, VP35, VP30 i L. Ma średnicę 80 nm i zawiera kanał centralny o średnicy 20–30 nm. Wirusowo
zakodowane glikoproteiny (GP) kolce o długości 10 nm i odległości 10 nm są obecne na zewnętrznej otoczce wirusowej wirionu, z której pochodzą
z błony komórkowej gospodarza. Pomiędzy otoczką a nukleokapsydem, w tak zwanej przestrzeni matrix, znajdują się białka wirusowe VP40 i VP24
usytuowany.
Rodzina wirusów Filoviridae obejmuje 3 rodzaje: Cuevavirus, Marburgvirus i Ebolavirus. Zidentyfikowano 5 gatunków:
Zair, Bundibugyo, Sudan, Reston i las Taï. Pierwsze 3 to wirus Bundibugyo Ebola, wirus Ebola Zaire i wirus Ebola Sudanu.
powiązano z dużymi ogniskami choroby w Afryce. Wirus powodujący epidemię w Afryce Zachodniej w 2014 r. należy do gatunku Zair.
Następnie wirus Ebola rozprzestrzenia się z człowieka na człowieka poprzez bezpośredni kontakt (przez uszkodzoną skórę lub błony śluzowe) z zakażonym wirusem.
krwią, wydzielinami, narządami lub innymi płynami ustrojowymi osób zakażonych oraz powierzchniami i materiałami (np. pościelą, odzieżą)
zanieczyszczone tymi płynami.
Okres inkubacji, czyli odstęp czasu od zakażenia wirusem do wystąpienia objawów, wynosi od 2 do 21 dni. Ludzie nie
zakaźne, dopóki nie wystąpią objawy. Pierwszymi objawami są nagłe pojawienie się gorączki, zmęczenia, bólu mięśni, bólu głowy i bólu gardła.
Następnie pojawiają się wymioty, biegunka, wysypka, objawy zaburzeń czynności nerek i wątroby, a w niektórych przypadkach zarówno wewnętrznych, jak i
krwawienie zewnętrzne (np. sączenie się z dziąseł, krew w stolcu). Wyniki badań laboratoryjnych obejmują małą liczbę białych krwinek i płytek krwi
i podwyższone enzymy wątrobowe.
Odróżnienie EVD od innych chorób zakaźnych, takich jak malaria, dur brzuszny i zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych, może być trudne. Potwierdzenie tego
objawy są spowodowane zakażeniem wirusem Ebola, przeprowadza się następujące badania:
⚫
Test immunoenzymatyczny wychwytujący przeciwciała (ELISA)
⚫
testy wykrywające wychwytywanie antygenu
⚫
test neutralizacji surowicy
⚫
Test reakcji łańcuchowej polimerazy z odwrotną transkryptazą (RT-PCR).
⚫
mikroskopia elektronowa
⚫
izolacja wirusa metodą hodowli komórkowej.
Próbki od pacjentów stwarzają skrajne ryzyko biologiczne; należy przeprowadzić badania laboratoryjne na nieinaktywowanych próbkach
maksymalne warunki ochrony biologicznej.
Szybki test na antygen wirusa Ebola to prosty, wizualny test jakościowy, który wykrywa antygen wirusa Ebola w ludzkiej krwi pełnej, surowicy lub
próbki plazmy. Test ten opiera się na immunochromatografii i może dać wynik po 15-20 minutach.
ZASADA TESTU
Szybki test na antygen wirusa Ebola to jakościowy test immunologiczny oparty na membranach, służący do wykrywania antygenów wirusa Ebola w organizmie człowieka.
próbki ludzkiej krwi pełnej, surowicy lub osocza. Po dodaniu próbki do studzienki na próbkę (S) na podkładce próbnej, próbka się poruszy
przez podkładkę z koniugatem i mobilizuje złoty koniugat przeciw wirusowi Ebola, który jest pokryty podkładką z koniugatem. Mieszanka przemieszcza się wzdłuż
błonę poprzez działanie kapilarne i reaguje z przeciwciałem przeciw wirusowi Ebola, które jest pokryte obszarem linii testowej (T). Jeśli próbka zawiera
Antygen wirusa Ebola, w obszarze linii testowej (T) pojawi się kolorowa linia, wskazując wynik pozytywny. Jeżeli próbka nie zawiera
Antygen wirusa Ebola, w tym regionie nie pojawi się kolorowa linia, co wskazuje na wynik negatywny. Wewnętrzna kontrola jakości jest uwzględniona w
testu, w postaci kolorowej linii pojawiającej się w obszarze linii kontrolnej (C), wskazującej, że test jest funkcjonalny, prawidłowy i wystarczający
nałożono objętość próbki, aby umożliwić migrację przez linię testową i kontrolną, niezależnie od tego, czy istnieje linia testowa, czy
nie. Jeżeli w czasie badania nie pojawi się linia kontrolna (C), wynik badania jest nieważny i należy powtórzyć badanie z nowym testem
urządzenie.
MATERIAŁY DOSTARCZONE
⚫
25 X Urządzenie testowe pakowane pojedynczo w folię ze środkiem osuszającym
⚫
2 X rozcieńczalnik próbki (6 ml)
⚫
25 X zakraplacza (30 ul)
⚫
1 X Ulotka dołączona do opakowania