Plazma IgM 96 sztuk Zestaw testowy Elisa Zestaw testowy przeciwciał HAV Diagnos

Zestaw HAV IgM Elisa 96 testów/zestaw

Nr katalogowy: BE301A

1. ZASADA

1. Ten zestaw wykorzystuje metodę przechwytywania ELISA do wykrywania przeciwciał anty-HAV IgM.Oczyszczonym mysim przeciwciałem przeciw ludzkim IgM (łańcuch μ) powleka się fazę stałą wielostudzienek.
2. Koniugat HAV-Ag dodaje się do pokrytych studzienek po dodaniu rozcieńczonej próbki i inkubacji.Następnie dodaje się HAV-Ag znakowane peroksydazą chrzanową.Jeśli w próbce obecne jest HAV-IgM, powstanie kompleks anty-łańcuch μ-HAV-IgM –HAV-Ag znakowany HRP.
3. Przemyć dołki w celu usunięcia innych niezwiązanych składników surowicy, inkubować z substratem (TMB) w celu wytworzenia barwnego produktu i zmierzyć absorbancję przy 450 nm, aby wskazać obecność lub brak HAV-IgM w próbce.
4. Test jest specjalny, czuły, powtarzalny i łatwy w obsłudze.

2. DOSTARCZONE MATERIAŁY

1. Płytka mikrodołkowa pokryta powłoką anty-μ-łańcuchową 1 blok (96 dołków)
2. Koniugant enzymatyczny (HAVAg-HRP) 1 butelka (6 ml)
3. Koniugat HAV-Ag 1 butelka (6 ml)
4. Surowica kontroli ujemnej 1 fiolka (1 ml)
5. Surowica kontroli dodatniej 1 fiolka (1 ml)
6. 20 x bufor do płukania (rozcieńczenie przed użyciem) 1 butelka (30 ml)
7. Substrat A 1 butelka (6ml)
8. Substrat B 1 butelka (6ml)
9. Roztwór zatrzymujący (2M H2SO4) 1 butelka (6 ml)
10. Plastikowa torba 1 worek
11. Papier uszczelniający 3 sztuki
12. Instrukcja 1 każdy

3. Procedura testowa

1. Doprowadzić zestaw ELISA dla przeciwciał IgM przeciwko wirusowi zapalenia wątroby typu A (wszystkie odczynniki) i próbki do temperatury pokojowej przed użyciem (około 30 minut).

2. Rozcieńczyć stężony bufor do płukania 1:19 ddH2O.

3. Rozcieńczyć próbkę (1:1000) solą fizjologiczną.

4. Dla każdego testu ustawić jedną ślepą próbę, dwie pozytywne i trzy negatywne kontrole.Dodać 100 μl surowicy kontroli pozytywnej i negatywnej odpowiednio do studzienek kontroli pozytywnej i negatywnej.

5. Dodaj 100 μl rozcieńczonej próbki do innych dołków testowych.

6. Przykryć dołki papierem uszczelniającym, a następnie inkubować 30 minut w 37°C.

7. Wylej płyn do wszystkich dołków i napełnij dołki roztworem do płukania.Odstawić na 15 sekund, wylać płyn do wszystkich dołków i napełnić dołki roztworem do płukania.Powtórz 5 razy i osusz dołki po ostatnim myciu.

8. Dodać 50 µl koniugatu HAV-Ag do każdego dołka z wyjątkiem ślepej próby.

9. Dodać 50 μl koniugatu enzymatycznego do każdego dołka z wyjątkiem ślepej próby

10.Przykryć dołki papierem uszczelniającym, a następnie inkubować 30 minut w 37°C.

11. Powtórz krok 7.

12.Dodaj odpowiednio 50 μl substratu A i B do każdego dołka, delikatnie wymieszaj, chroniąc przed światłem i inkubuj 15 minut w 37°C.

13. Dodaj 50 μl roztworu zatrzymującego reakcję do każdego dołka, aby zatrzymać reakcję, w tym do ślepego dołka.

14. Zmierz absorbancję przy 450 nm względem ślepej próby lub zmierz absorbancję przy 450 nm/630-690 nm.