Zestaw testowy HEV IgM Elisa, surowica vs osocze do wykrywania przeciwciał

Zestaw do diagnostyki przeciwciał IgM przeciwko wirusowi zapalenia wątroby typu E (ELISA)
Numer katalogowy: BE402A

1. ZASADA

Zestaw ten wykorzystuje metodę wychwytywania fazy stałej ELISA do wykrywania przeciwciał IgM przeciwko HEV (anty-HEV) w surowicy lub osoczu z dwuetapową procedurą inkubacji.Mikrostudzienka polistyrenowa jest wstępnie pokryta oczyszczonym, aktywowanym mysim przeciwciałem monoklonalnym przeciwko ludzkiej IgM (łańcuch μ).Rekombinowany antygen HEV sprzężony z HRP służy jako znacznik.TMB jest substratem dla HRP.Reakcja enzymatyczna z substratem TMB powoduje zmianę koloru, a intensywność absorbancji przy 450 nm wskazuje na obecność lub brak przeciwciał IgM anty-HEV w próbce.Test jest specyficzny, czuły, powtarzalny i łatwy w obsłudze.Służy do diagnozowania wczesnej infekcji i badania epidemii.

2. DOSTARCZONE MATERIAŁY

1. Płytka mikrodołkowa pokryta antygenem 1 blok (96 dołków)
2. Rozcieńczalniki do próbek 1 butelka (12 ml)
3. Koniugant enzymatyczny (antyludzkie IgM-HRP) 1 butelka (12 ml)
4. Kontrola ujemna 1 fiolka (1 ml)
5. Kontrola pozytywna 1 fiolka (1 ml)
6.20 X bufor do płukania (rozcieńczenie przed użyciem) 1 butelka (30 ml)
7. Substrat A 1 butelka (6ml)
8. Substrat B 1 butelka (6ml)
9. Roztwór zatrzymujący (2M H2SO4) 1 butelka (6 ml)
10. Plastikowa torba 1 worek
11. Papier uszczelniający 3 sztuki
12. Instrukcja 1 każdy

3PROCEDURA TESTOWA

1. Doprowadzić zestaw ELISA dla przeciwciał IgG przeciwko wirusowi zapalenia wątroby typu E (wszystkie odczynniki) i próbki do temperatury pokojowej przed użyciem (około 30 minut).

2. Rozcieńczyć stężony bufor do płukania 1:19 ddH2O.

3. Dla każdego testu ustawić jedną ślepą próbę, dwie pozytywne i trzy negatywne kontrole.Dodać 100 μl surowicy kontroli pozytywnej i negatywnej odpowiednio do studzienek kontroli pozytywnej i negatywnej.

4. Dodać 100 μl rozcieńczalników do próbek do każdego dołka testowego, a następnie 10 μl próbki testowej do dołków testowych.Pipetować w górę iw dół, aby dobrze wymieszać próbki.

5. Przykryj dołki papierem uszczelniającym, a następnie inkubuj 30 minut w 37°C.

6. Wylej płyn do wszystkich dołków i napełnij dołki roztworem do płukania.Odstawić na 15 sekund, wylać płyn do wszystkich dołków i napełnić dołki roztworem do płukania.Powtórz 5 razy i osusz dołki po ostatnim myciu.

7. Dodać 100 µl koniugatu enzymatycznego do każdego dołka z wyjątkiem ślepej próby.

8. Przykryj dołki papierem uszczelniającym, a następnie inkubuj 30 minut w 37°C.

9. Powtórz krok 6.

10. Dodaj odpowiednio 50 μl substratu A i B do każdego dołka, w tym do ślepego dołka.Delikatnie wymieszać, chronić przed światłem i inkubować 15 minut w 37°C.

11. Dodaj 50 μl roztworu zatrzymującego reakcję do każdego dołka, aby zatrzymać reakcję, w tym do ślepego dołka.

12. Zmierzyć absorbancję przy 450 nm względem ślepej próby lub zmierzyć absorbancję przy 450 nm/630-690 nm.