TEST TSH ELISA TSH TYROTROPINY Test hormonu stymulującego tarczycę

Gorąca sprzedaż TSH ELISA TEST KIT
REF: DS177701 96 testów

Przeznaczenie
Test immunologiczny do ilościowego oznaczania in vitro tyreotropiny w surowicy ludzkiej.

1. Podsumowanie

• Hormon stymulujący tarczycę (TSH, tyreotropina) to glikoproteina o masie cząsteczkowej ok. 2,3.30000 daltonów i składa się z dwóch podjednostek.
• Pomiar stężenia w surowicy często tyreotropiny (TSH), glikoproteiny o masie cząsteczkowej 28 000 daltonów, wydzielanej z przedniego płata przysadki, jest powszechnie uważany za najczulszy dostępny wskaźnik w diagnostyce pierwotnej i wtórnej (przysadkowej) niedoczynności tarczycy (1, 2).
• Pomiary TSH są równie przydatne w różnicowaniu wtórnej i trzeciorzędowej (podwzgórzowej) niedoczynności tarczycy od pierwotnej choroby tarczycy.Uwalnianie TSH z przysadki jest regulowane przez czynnik uwalniający tyreotropinę (TRH), który jest wydzielany przez podwzgórze oraz przez bezpośrednie działanie hormonów tarczycy T4 i trójjodotyroniny (T3) na przysadkę.
• Zwiększenie poziomów T3 i T4 zmniejsza odpowiedź przysadki na stymulujące działanie TRH.W wtórnej i trzeciorzędowej niedoczynności tarczycy stężenia T4 są zwykle niskie, a poziomy TSH są na ogół niskie lub prawidłowe.Powoduje to albo przysadkowy niedoczynność TSH (wtórna niedoczynność tarczycy), albo niewystarczająca stymulacja przysadki przez TRH (trzeciorzędowa niedoczynność tarczycy).
• Test stymulacji TRH różnicuje te stany.We wtórnej niedoczynności tarczycy, odpowiedź TSH na TRH jest stępiona, podczas gdy odpowiedź normalną lub opóźnioną uzyskuje się w trzeciorzędowej niedoczynności tarczycy. Co więcej, pojawienie się testów immunoenzymometrycznych zapewniło laboratorium wystarczającą czułość, aby umożliwić odróżnienie nadczynności tarczycy od populacji w stanie eutyreozy i zwiększenie użyteczności Pomiary TSH.Ta metoda jest testem drugiej generacji, który zapewnia środki do rozróżniania w zakresie nadczynności tarczycy i eutyreozy.(3)

2. Odczynniki Dostarczone materiały
• Powlekana mikropłytka, 8 x 12 pasków, 96 studzienek, wstępnie pokryta mysim monoklonalnym anty-TSH.
• Kalibratory, 6 fiolek po 1 ml, gotowe do użycia;Stężenia: 0(A), 0,5(B), 2(C), 5(D), 10(E) i 25(F) μIU/ml.
• Koniugat enzymatyczny, 1 fiolka, 6,0 ml mysiego przeciwciała monoklonalnego anty-TSH znakowanego HRP (peroksydaza chrzanowa) w buforze Tris-NaCl zawierającym BSA (albumina surowicy bydlęcej).Zawiera 0,1% konserwant ProClin300.
• Substrat, 1 fiolka, 11 ml, gotowy do użycia, (tetrametylobenzydyna) TMB.
• Roztwór zatrzymujący, 1 fiolka, 6,0 ml 1 mol/l kwasu siarkowego.
• Koncentrat roztworu do płukania, 1 fiolka, 25 ml (stężony 40X), roztwór do płukania PBS-Tween.
• IFU, 1 kopia.
• Pokrywka do talerza: 1 sztuka.

Wymagane materiały (ale nie dostarczone)
• Czytnik mikropłytek o zdolności pochłaniania fal 450nm i 620nm.
• Myjka do mikropłytek.
• Inkubator.
• Wytrząsarka do talerzy.
• Mikropipety i mikropipety wielokanałowe dostarczające 50 μl z dokładnością lepszą niż 1,5%.
• Papier chłonny.
• Woda destylowana

3. Procedura testowa

Upewnij się, że próbki pacjentów, kalibratory i kontrole mają temperaturę otoczenia (18-25 ℃) przed pomiarem.Wymieszać wszystkie odczynniki przez delikatne odwracanie przed użyciem.

• Należy używać tylko wymaganej liczby dołków i sformatować dołki mikropłytek dla każdego kalibratora i próbki, która ma być oznaczona.• Dodaj 25 µL kalibratorów lub próbek do każdego dołka.

• Dodaj 100 µl koniugatu enzymu do każdego dołka.

• Delikatnie wstrząsać mikropłytką przez 30 sekund, aby wymieszać.

• Przykryj płytkę pokrywką i inkubuj w 37 ℃ przez 60 minut.

• Wyrzucić zawartość mikropłytki przez dekantację lub aspirację.Jeśli dekantujesz, postukaj i osusz płytkę chłonnym papierem.

• Dodać 350 µl roztworu do płukania, zdekantować (ostukać i osuszyć) lub zaaspirować.Powtórz 4 dodatkowe razy, w sumie 5 prań.Można zastosować automatyczną myjkę pasków do mikropłytek.Pod koniec mycia odwrócić płytkę i wytrzepać resztki roztworu myjącego na bibułę chłonną.

• Dodaj 100 µl substratu do każdego dołka.

• Przykryj i inkubuj w temperaturze otoczenia (18-25℃) w ciemności do reakcji przez 20 minut.Nie wstrząsać płytki po dodaniu substanu.

• Dodaj 50 µl roztworu zatrzymującego reakcję do każdego dołka.

• Wstrząsaj przez 15-20 sekund, aby wymieszać płyn w dołkach.Ważne jest, aby kolor niebieski zmienił się całkowicie na żółty.

• Odczytaj absorbancję każdego dołka przy 450 nm (stosując 620 do 630 nm jako referencyjną długość fali w celu zminimalizowania niedoskonałości dołków) w czytniku mikropłytek.Wyniki należy odczytać w ciągu 30 minut od dodania roztworu zatrzymującego