Zestaw testowy FT3 Elisa 110 minut wolnego badania krwi bez trijodotyroniny T3

FT3
ZESTAW TESTOWY FT3 ELISA

Wolna trójjodotyronina 96 testów

1. Przeznaczenie
Test immunologiczny do ilościowego oznaczania in vitro wolnej trójjodotyroniny w ludzkiej surowicy.

2. Podsumowanie

• Trijodotyronina jest jednym z hormonów tarczycy obecnych w surowicy, który reguluje metabolizm.Oznaczenie stężenia tego hormonu jest ważne dla diagnostycznego różnicowania stanów eutyreozy, nadczynności i niedoczynności tarczycy.Główna frakcja całkowitej trójjodotyroniny jest związana z białkami transportowymi (TBG, prealbumina, albumina).
• Wolna trijodotyronina (fT3) jest fizjologicznie aktywną formą hormonu tarczycy trijodotyroniny (T3).
• Oznaczanie wolnej T3 ma tę zaletę, że jest niezależne od zmian stężeń i właściwości wiążących białek wiążących;dodatkowe określenie parametru wiązania (wychwyt T, TBG) nie jest zatem konieczne.W prawidłowej funkcji tarczycy, wraz ze zmianą stężenia białek nośnikowych, całkowity poziom T3 zmienia się tak, że stężenie FT3 pozostaje stałe.
• Zatem pomiary stężeń FT3 są bardziej wiarygodnie skorelowane ze stanem klinicznym niż całkowite poziomy T3.
• lub na przykład, wzrost całkowitego poziomu T3 związany z ciążą, doustnymi środkami antykoncepcyjnymi i terapią estrogenową skutkuje wyższymi całkowitymi poziomami T3, podczas gdy stężenie FT3 pozostaje zasadniczo niezmienione.Ponadto stwierdzono, że średnia wartość FT3 ma gradient malejący od młodszego do starszego.
• Odczynniki

3. Dostarczone materiały
• Powlekana mikropłytka, 8 x 12 pasków, 96 studzienek, wstępnie pokryta pochodną T3.
• Kalibratory, 6 fiolek po 1 ml, gotowe do użycia;Stężenia: 0(A), 2(B), 5(C), 10(D), 20(E) i 50(F) pmol/L.
• Koniugat enzymatyczny, 1 fiolka, 6,0 ml owczego monoklonalnego przeciwciała anty-T3 znakowanego HRP (peroksydaza chrzanowa) w buforze Tris-NaCl zawierającym BSA (albumina surowicy bydlęcej).Zawiera 0,2% konserwant ProClin300.
• Substrat, 1 fiolka, 11 ml, gotowy do użycia, (tetrametylobenzydyna) TMB.
• Roztwór zatrzymujący, 1 fiolka, 6,0 ml 1 mol/l kwasu siarkowego.
• Koncentrat roztworu do płukania, 1 fiolka, 25 ml (stężony 40X), roztwór do płukania PBS-Tween.
• IFU, 1 kopia.
• Pokrywka do talerza: 1 sztuka.

Wymagane materiały (ale nie dostarczone)
• Czytnik mikropłytek o zdolności pochłaniania fal 450nm i 620nm.
• Myjka do mikropłytek.
• Inkubator.
• Wytrząsarka do talerzy.
• Mikropipety i mikropipety wielokanałowe dostarczające 50 μl z dokładnością lepszą niż 1,5%.
• Papier chłonny.
• Woda destylowana.

4. Testuj produkcję

Upewnij się, że próbki pacjentów, kalibratory i kontrole mają temperaturę otoczenia (18-25 ℃) przed pomiarem.Wymieszać wszystkie odczynniki przez delikatne odwracanie przed użyciem.

• Należy używać tylko wymaganej liczby dołków i sformatować dołki mikropłytek dla każdego kalibratora i próbki, która ma być oznaczona.• Dodaj 50 µl kalibratorów lub próbek do każdego dołka.

• Dodaj 50 µl koniugatu enzymu do każdego dołka.

• Delikatnie wstrząsać mikropłytką przez 30 sekund, aby wymieszać.

• Przykryj płytkę pokrywką i inkubuj w 37 ℃ przez 60 minut.

• Wyrzucić zawartość mikropłytki przez dekantację lub aspirację.Jeśli dekantujesz, postukaj i osusz płytkę chłonnym papierem.

• Dodać 350 µl roztworu do płukania, zdekantować (ostukać i osuszyć) lub zaaspirować.Powtórz 4 dodatkowe razy, w sumie 5 prań.Można zastosować automatyczną myjkę pasków do mikropłytek.Pod koniec mycia odwrócić płytkę i wytrzepać resztki roztworu myjącego na bibułę chłonną.• Dodaj 100 µl substratu do każdego dołka.

• Przykryj i inkubuj w temperaturze otoczenia (18-25℃) w ciemności do reakcji przez 20 minut.Nie wstrząsać płytki po dodaniu substanu.• Dodaj 50 µl roztworu zatrzymującego reakcję do każdego dołka.

• Wstrząsaj przez 15-20 sekund, aby wymieszać płyn w dołkach.Ważne jest, aby kolor niebieski zmienił się całkowicie na żółty.• Odczytaj absorbancję każdego dołka przy 450 nm (stosując długość fali 620 do 630 nm jako referencyjną długość fali w celu zminimalizowania niedoskonałości dołków) w czytniku mikropłytek. Wyniki należy odczytać w ciągu 30 minut od dodania roztworu zatrzymującego.