Wirus denga jest flawiwirusem występującym głównie na obszarach tropikalnych i subtropikalnych.

W związku z tym, w przypadku wirusa dengue występują różne rodzaje serotypów, a przenoszenie następuje przez komary, głównie Aedes aegypti i Aedes albopictus.

Wirusy przenoszone przez komary (serotyp 1-4) powodują gorączkę denga, ciężką chorobę grypopodobną.

Światowa Organizacja Zdrowia (WHO) szacuje, że obecnie w Europie występuje większa liczba zakażeń chorobami, które występują w regionach tropikalnych trzeciego świata i rozprzestrzeniają się w subtropikalnych krajach rozwiniętych, w tym w Stanach Zjednoczonych.

że co roku na całym świecie występuje 50-80 milionów przypadków gorączki denga, w tym potencjalnie śmiertelna forma choroby zwanej

Pierwotne zakażenie wirusem dengue powoduje samobójstwo.

ograniczająca choroba charakteryzująca się łagodną do wysoką gorączką trwającą od 3 do 7 dni, silnym bólem głowy z bólem za oczami, mięśniami

W wielu częściach południowo-wschodnich USA częściej występuje infekcja wtórna.

Choroba ta jest bardziej poważna i może powodować DHF i DSS.

Może to obejmować wysoką gorączkę, krwotoki i niewydolność krążenia, a śmiertelność może wynosić nawet 40%.

Diagnoza DSS jest szczególnie ważna, ponieważ pacjenci mogą umrzeć w ciągu 12 do 24 godzin, jeśli nie zostaną poddani odpowiedniemu leczeniu.

podawane.

Pierwotne zakażenie wirusem dengue charakteryzuje się podwyższeniem poziomu specyficznego antygenu NS1 od 0 do 9 dni po wystąpieniu choroby.

Wcześniejsza diagnoza gorączki denga zmniejsza ryzyko powikłań, takich jak DHF lub DSS,

zwłaszcza w krajach, w których dengue jest endemiczne.

Procedura badania

1Wszystkie odczynniki powinny być dopuszczone do osiągnięcia temperatury pokojowej przez 15 minut przed użyciem.

2. Przed użyciem rozcieńczyć bufor do prania w tempie rozcieńczenia 1:40 wodą destylowaną.

3. Dodać 100μL rozcieńczalnika próbki do odpowiedniej studni, dodać 10μL próbki do odpowiedniej studni (nie dodawać do pustych studni).Dodać 100 μL pozytywnej kontroli i kontroli ujemnej do studni kontroli ujemnej i studni kontroli ujemnejPróbka powinna odpowiadać liczbie mikroplatek, każda płyta powinna być wyposażona w 2 studnie kontroli ujemnej, 1 studnię kontroli dodatniej i 1 studnię kontroli pustej.

Uwaga: W celu uniknięcia skażenia krzyżowego należy użyć oddzielnego końca pipety do usuwania dla każdej próbki, kontroli negatywnej i pozytywnej.

4. delikatnie wstrząsnąć, aby zmieszać przez 30 minut. inkubować w temperaturze 37°C przez 30 minut z membranową płytą uszczelniającą płytę.

5. Po zakończeniu inkubacji, usunąć i wyrzucić pokrywę płytki. Wyjąć, dodać bufor do mycia do każdej studni przez 20 sekund. Powtórzyć 5 razy. Po ostatnim cyklu prania,przesuń talerz na papier czysty lub ręcznik, i dotknij, aby usunąć pozostałości.

6. odpowiednio dodaje się 50 μL konjugacji (nie dodaje się do pustych studni).

7. Inkubacja w temperaturze 37°C przez 30 minut z membranową płytką uszczelniającą płytkę.

8. Dodać podłoże A (50μL) i podłoże B (50μL) (nie dodawać do próżni).

9. Dodać 50 μL roztworu Stop do każdej studni (nie dodawać do pustej studni).Kalibracja czytnika płytki z Blank dobrze i odczytać absorbancji w 450nm. Jeśli używany jest instrument podwójnego filtra, ustawić długość fali odniesienia na 630 nm. Nie wolno ustawić pustych studni, jeśli do wykrywania używa się podwójnej długości fali. Obliczyć wartość odcięcia i ocenić wyniki.

• Przechowywać w temperaturze 2- 8°C.

• Niewykorzystane studnie umieszcza się w aluminiowej foliowanej torbie z zamkiem zip-lock i zwraca się do temperatury 2- 8 °C, w których warunkach studnie pozostaną stabilne przez 2 miesiące,lub do oznaczonej daty ważności, w zależności od tego, która z tych dat jest wcześniejsza.

• Zamknąć i zwrócić niewykorzystane kalibratory do temperatury 2-8 °C, w których warunkach stabilność utrzyma się przez 1 miesiąc, w przypadku dłuższego użytkowania przechowywać otwarte kalibratory w aliquotach i zamrażać w temperaturze 20 °C.Unikaj wielokrotnych cykli zamrażania i roztopiania.

• Zamknąć i zwrócić wszystkie pozostałe niewykorzystane odczynniki do temperatury 2- 8 °C, w których warunkach stabilność zostanie zachowana przez 2 miesiące lub do oznaczonej daty ważności, w zależności od tego, która z tych dat nastąpi wcześniej.