Zestaw badawczy Elisa przeciw wirusowi HCV o wysokiej specyficzności dla 96 testów i 1,5-3 godzinie czasu badania

Test anty-HCV jest testem immunoenzymatycznym (ELISA) do jakościowego oznaczania wirusa HCV w ludzkim surowicy i osoczu.

Wirus zapalenia wątroby typu C jest najczęstszą przyczyną poprzetoczeniowego i nabytego w społeczności zapalenia wątroby typu non-A, non-B na świecie. Zakażenie HCV często prowadzi do przewlekłego zapalenia wątroby i marskości, a także jest związane z rozwojem raka wątrobowokomórkowego. Wirus zapalenia wątroby typu C jest otoczkowym wirusem RNA o dodatniej nici, który został sklasyfikowany jako własny rodzaj w rodzinie Flaviviridae. Genom składa się z około 9,5 kb kodującego polipeptyd o długości 3000 aminokwasów, zawierający domeny strukturalne i niestrukturalne. Podobnie jak inne wirusy RNA, genom HCV wykazuje znaczną heterogenność w wyniku mutacji występujących podczas replikacji wirusa. Na całym świecie opisano co najmniej 11 genetycznie odrębnych genotypów oraz wiele podtypów i wariantów wirusa. Zakażenie specyficznymi genotypami może wpływać na ciężkość choroby i odpowiedź na leczenie. Zapalenie wątroby typu C jest przenoszone głównie przez skażoną krew i produkty krwiopochodne, a w mniejszym stopniu przez ludzkie wydzieliny ustrojowe.

Metoda pośrednia. Całkowity czas badania: 100 minut

Test ELISA anty-HCV wykorzystuje metodę ELISA na fazie stałej, pośrednią, do wykrywania przeciwciał przeciwko HCV w dwuetapowej procedurze inkubacji. Paski mikropłytek polistyrenowych są wstępnie pokryte rekombinowanymi, wysoce immunoreaktywnymi antygenami odpowiadającymi regionom rdzeniowym i niestrukturalnym HCV (NS3, NS4 i NS5), które mogą wykrywać wszystkie genotypy HCV. Podczas pierwszego etapu inkubacji specyficzne przeciwciała anty-HCV, jeśli są obecne, wiążą się z antygenami HCV wstępnie pokrytymi na fazie stałej. Płytki są przemywane w celu usunięcia niezwiązanych białek surowicy, a następnie dodawane są przeciwciała anty-ludzkie IgG (anty-IgG) sprzężone z enzymem peroksydazą chrzanową (konjugat HRP). Podczas drugiego etapu inkubacji te sprzężone z HRP przeciwciała wiążą się z wszelkimi kompleksami antygen-przeciwciało (IgG) utworzonymi wcześniej, a niezwiązany konjugat HRP jest następnie usuwany przez przemywanie. Do płytek dodawane są roztwory chromogenów zawierające Tetrametylobenzydynę (TMB) i nadtlenek mocznika, a w obecności kompleksu immunologicznego antygen-przeciwciało-anty-IgG (HRP), bezbarwne chromogeny są hydrolizowane przez związany konjugat HRP do produktu o niebieskim zabarwieniu. Niebieski kolor zmienia się na żółty po zatrzymaniu reakcji kwasem siarkowym. Intensywność koloru można zmierzyć i jest ona proporcjonalna do ilości przeciwciał wychwyconych w płytkach, a tym samym do ilości przeciwciał w próbce. Płytki zawierające próbki negatywne na anty-HCV pozostają bezbarwne.