1Wyliczyć pożądaną liczbę mikrokurków.
plastikowy worek, zamknięty i przechowywany w temperaturze 2-8°C do późniejszego użycia.
2Dodaj kalibratory i próbki:
2.1 Pustka studnia: Nie dodawać odczynników.
2. 2 Studnia kalibratorów: Dodać 100 μL kalibratorów do wyznaczonych studni sterujących.
2.3 Studnie badawcze: Dodać 100 UL rozcieńczalnika próbki do studni badawczych, a następnie dodać 10 UL próbki do odpowiedniej studni.
2.4 delikatnie potrząsnąć płytką przez 20 sekund, a następnie zakryć płytkę uszczelniaczem.
3. Inkubacja: Inkubacja talerza w temperaturze 37°C przez 30 minut.
4. Krok prania (może być wykonywany ręcznie lub z automatycznym praniem):
Ręczne mycie: ostrożnie usunąć mieszaninę inkubatywną, wyrzucając roztwór do pojemnika z odpadami.
Wstrzyknąć delikatnie przez 20-30 sekund.
Po zakończeniu ostatniego kroku mycia, dotknij płytki na papierze absorbującym, aby usunąć pozostałość płynu.
Automatyczne mycie: do zapewnienia skutecznego prania należy wykalibrować automatyczne zmywarki na talerze.
Rozcieńczyć bufor do mycia i zanurzyć przez 20-30 sekund.
5Konjugat: dodaje się 100 μL konjugatu do każdej studni z wyjątkiem studni pustej.
6Inkubacja: pokrycie studni i inkubacja w temperaturze 37°C przez 30 minut.
7. Krok mycia: płytkę należy myć 5 razy zgodnie ze wskazaniami w kroku 4.
8Substrat: dodaj 50 μL substratu A i 50 μL substratu B do każdej studni, w tym do studni pustej.
Inkubacja w temperaturze 37°C w ciemności przez 15 minut.
9. Roztwór zatrzymujący: dodaj 50 μL roztworu zatrzymującego do każdej studni. W studniach zawierających pozytywne próbki powinien rozwinąć się żółty kolor.
10. Odczytywanie wyników: odczytywanie w temperaturze 450/630-700 nm w ciągu 30 minut.
1Uwaga: Mikroplata może być odczytywana również w odległości 450 nm, ale zdecydowanie zaleca się odczytywanie jej w odległości 450/630-700 nm dla
lepsze wyniki.
Chronometria: odczytanie gęstości optycznej próbki (OD) przy 450 nm za pomocą czytnika mikroplatek.
Średnia wartość OD kontroli negatywnej ≤ 0,1 i średnia wartość OD kontroli dodatniej ≥ 0.8, badanie jest ważne,
w przeciwnym razie badanie jest nieważne.
Wartość odcięcia (C.O.) = Średnia wartość OD kontroli ujemnej x 3 (obliczona przez 0,10 gdy średnia
wartość OD kontroli ujemnej wynosi < 0.10, obliczone na podstawie rzeczywistej wartości, gdy średnia ujemna kontrola OD
Twoja wiadomość musi mieć od 20 do 3000 znaków!
Polish
