Wyłącznie do diagnostyki in vitro i użytku profesjonalnego.
Nazwa
Zestaw do testu ELISA na przeciwciała IgG przeciwko Ct (surowica/osocze)
PRZEZNACZENIE
Ten zestaw służy do jakościowego wykrywania przeciwciał IgG przeciwko Chlamydia trachomatis (Ct) w ludzkiej surowicy/osoczu. Zestaw jest
odpowiedni do badań przesiewowych i diagnostyki klinicznej infekcji Ct w surowicy/osoczu.
ZASADA DZIAŁANIA TESTU
Antygen Ct jest zaabsorbowany w fazie stałej na płytce mikrotitracyjnej z polistyrenu. Jeśli w próbce testowej znajdują się przeciwciała IgG
przeciwko Ct, wiążą się one z antygenem Ct pokrywającym płytkę mikrotitracyjną, tworząc kompleks antygen-przeciwciało, a następnie
wiążą się z przeciwciałem znakowanym enzymem i tworzą kompleks antygen-przeciwciało-przeciwciało na powierzchni
płytki mikrotitracyjnej, a pod wpływem substratu w odpowiednich dołkach pojawia się niebieskie zabarwienie. W związku z tym można
specyficznie wykryć przeciwciała IgG przeciwko Ct w ludzkiej surowicy/osoczu.
PROCEDURA TESTOWA
1. Przed użyciem wszystkie odczynniki należy doprowadzić do temperatury pokojowej przez 15 minut.
2. Przed użyciem należy rozcieńczyć bufor do przemywania w stosunku 1:40 wodą destylowaną.
3. Dodać 100 µL rozcieńczalnika do próbek do odpowiednich dołków (nie dodawać do dołka kontroli blank, dołków kontroli negatywnej i dołka kontroli pozytywnej). Próbki powinny odpowiadać liczbie dołków na płytce mikrotitracyjnej. Każda płytka powinna być wyposażona w 2 dołki kontroli negatywnej, 1 dołek kontroli pozytywnej i 1 dołek kontroli blank. Dodać 5 µL próbki do odpowiedniego dołka, dokładnie wymieszać pipetą, dodać
50 µL kontroli negatywnej i pozytywnej do dołków kontroli negatywnej i pozytywnej (nie dodawać do dołka kontroli blank).
Uwaga: Używać oddzielnej, jednorazowej końcówki pipety dla każdej próbki, kontroli negatywnej i pozytywnej, aby
uniknąć zanieczyszczenia krzyżowego.
4. Delikatnie wstrząsnąć w celu wymieszania przez 30 sekund. Inkubować w temperaturze 37°C przez 20 minut z membraną uszczelniającą płytkę.
5. Po zakończeniu inkubacji usunąć i wyrzucić pokrywę płytki. Wyjąć, dodać bufor do przemywania do
każdego dołka na 20 sekund. Powtórzyć 5 razy. Po ostatnim cyklu przemywania odwrócić płytkę na
papier chłonny lub czysty ręcznik i postukać, aby usunąć wszelkie pozostałości.
6. Dodać odpowiednio 50 µL koniugatu enzymatycznego (nie dodawać do dołka kontroli blank).
7. Inkubować w temperaturze 37°C przez 20 minut z membraną uszczelniającą płytkę. Powtórzyć krok
przemywania 5 razy, jak w kroku 5.
8. Dodać 50 µL substratu A i 50 µL substratu B (nie dodawać do dołka kontroli blank). Inkubować w temperaturze 37°C przez
10 minut z membraną uszczelniającą płytkę.
9. Dodać 50 µL roztworu przerywającego do każdego dołka (nie dodawać do dołka kontroli blank). Delikatnie wymieszać przez wstrząsanie, odczytać
absorbancję w ciągu 10 minut po przerwaniu reakcji. Skalibrować czytnik płytek z dołkiem blank i odczytać absorbancję przy 450 nm. Jeśli używany jest instrument z podwójnym filtrem, ustawić długość fali odniesienia na 630 nm. Nie wolno używać dołka blank przy detekcji dwudługofalowej. Obliczyć
wartość graniczną i ocenić wyniki.
INTERPRETACJA WYNIKÓW
Chronometria: Odczytać gęstość optyczną (OD) próbki przy 450 nm za pomocą czytnika płytek mikrotitracyjnych.
Średnia wartość OD kontroli negatywnej ≤ 0,1 i średnia wartość OD kontroli pozytywnej ≥ 0,8, test jest ważny,
w przeciwnym razie test jest nieważny.
Wartość graniczna (C.O.) = Średnia wartość OD kontroli negatywnej x 3 (obliczona jako 0,10, gdy średnia
wartość OD kontroli negatywnej wynosi
< 0,10, obliczona na podstawie rzeczywistej wartości, gdy średnia wartość OD kontroli negatywnej
wynosi > 0,10).
Wyniki pozytywne: Wartość OD próbki ≥ C.O.
Twoja wiadomość musi mieć od 20 do 3000 znaków!
Polish
