Ludzka trombomodulina TM Fetomodulina CD141 THBD THRM ELISA Kit

Trombomodulina ludzka,TM,Fetomodulina,CD141,THBD,THRM ELISA Zestaw do użytku badawczego

Trombomodulina ludzka,TM,Fetomodulina,CD141,THBD,THRM ELISA Kit

Materiały dostarczone z zestawem

Zasada

Ten zestaw ELISA wykorzystuje metodę Sandwich-ELISA.Dostarczona w tym zestawie płytka Microelisa została wstępnie pokryta przeciwciałem swoistym dla trombomoduliny .Standardy lub próbki są dodawane do odpowiednich studzienek płytki Microelisa i łączone ze specyficznym przeciwciałem.Następnie do każdego dołka płytki paskowej Microelisa dodaje się przeciwciało skoniugowane z peroksydazą chrzanową (HRP) swoiste dla trombomoduliny i inkubuje.Wolne składniki są wypłukiwane.Do każdego dołka dodaje się roztwór substratu TMB.Tylko te dołki, które zawierają trombomodulinę i przeciwciało trombomoduliny sprzężone z HRP będą miały kolor niebieski, a następnie zmienią kolor na żółty po dodaniu roztworu zatrzymującego.Gęstość optyczną (OD) mierzy się spektrofotometrycznie przy długości fali 450 nm.Wartość OD jest proporcjonalna do stężenia trombomoduliny.Stężenie trombomoduliny w próbkach można obliczyć porównując OD próbek z krzywą standardową.

przygotowanie próbki

1.Przygotowanie serum

Po pobraniu pełnej krwi należy pozostawić krew do skrzepnięcia, nie zakłócając jej w temperaturze pokojowej.Zwykle zajmuje to 10-20 minut.Usuń skrzep przez wirowanie przy 2000-3000 obr./min przez 20 minut.Jeśli podczas rezerwacji pojawią się osady, próbkę należy ponownie odwirować.

2.Przygotowanie osocza

Krew pełną pobrać do probówek z antykoagulantem (EDTA lub cytrynian).Po inkubacji w temperaturze pokojowej przez 10-20 minut probówki odwirowuje się przez 20 minut przy 2000-3000 obr./min.Ostrożnie zebrać supernatant jako próbki osocza.Jeśli podczas rezerwacji pojawią się osady, próbkę należy ponownie odwirować.

3.Próbki moczu

Zbierz mocz do aseptycznych probówek.Ostrożnie zebrać supernatant po wirowaniu przez 20 min przy 2000-3000 obr./min.Jeśli podczas rezerwacji pojawią się osady, próbkę należy ponownie odwirować.Procedura przygotowania płynu mózgowo-rdzeniowego i płynu opłucnowo-otrzewnowego jest taka sama jak w przypadku próbki moczu.

4.Próbki komórek

Jeśli chcesz wykryć wydzieliny komórek, zbierz supernatant z hodowli do aseptycznych probówek.Ostrożnie zebrać supernatant po wirowaniu przez 20 min przy 2000-3000 obr./min.Jeśli chcesz wykryć składniki wewnątrzkomórkowe, rozcieńcz komórki do 1X10⁶/ml z PBS (pH 7,2-7,4).Komórki zostały zniszczone w celu uwolnienia składników wewnątrzkomórkowych przez wielokrotne zamrażanie i rozmrażanie.Ostrożnie zebrać supernatant po wirowaniu przez 20 min przy 2000-3000 obr./min.Jeśli podczas rezerwacji pojawią się osady, próbkę należy ponownie odwirować.

5.Próbki tkanek

Próbki tkanek są cięte, ważone, zamrażane w ciekłym azocie i przechowywane w temperaturze -80 ℃ do wykorzystania w przyszłości.Próbki tkanek homogenizowano po dodaniu PBS (pH 7,4).Próbki powinny być obsługiwane w temperaturze 4 ℃.Ostrożnie zebrać supernatant po wirowaniu przez 20 min przy 2000-3000 obr./min.Podziel supernatant do testu ELISA i do wykorzystania w przyszłości.

Uwagi:

• Ekstrakcję próbki i test ELISA należy przeprowadzić jak najszybciej po pobraniu próbki.Próbki należy pobrać zgodnie z odpowiednią literaturą.Jeśli testu ELISA nie można wykonać natychmiast, próbki można przechowywać w temperaturze -20 ℃. Należy unikać powtarzających się cykli zamrażania-rozmrażania.
• Nasze zestawy nie mogą być używane do próbek z NaN3, które mogą hamować aktywność HRP.