Szczegóły Produktu:
|
Zalecana nazwa: | 8-hydroksy-dezoksyguanozyna | Krótkie nazwy: | 8-OHdG |
---|---|---|---|
metoda: | Kanapka | Cat. Kot. No. Nie.: | W-Mo1117 |
Termin ważności: | Pół roku | Stosowanie: | Surowica myszy, osocze, pożywka hodowlana lub dowolny płyn biologiczny. |
Podkreślić: | Zestaw 8-OHdG ELISA,Zestaw Myszy 8-hydroksydeoksyguanozyny,Zestaw Sandwich 8OHdG ELISA |
Zestaw 8-hydroksy-dezoksyguanozyny mysiej; 8-OHdG ELISA Kit
Zasada
Ten zestaw ELISA wykorzystuje metodę Sandwich-ELISA.Dostarczona w tym zestawie płytka Microelisa została wstępnie pokryta przeciwciałem specyficznym dla 8-OHdG.Standardy lub próbki są dodawane do odpowiednich studzienek płytki Microelisa i łączone ze specyficznym przeciwciałem.Następnie do każdego dołka płytki paskowej Microelisa dodaje się przeciwciało skoniugowane z peroksydazą chrzanową (HRP) swoiste wobec 8-OHdG i inkubuje.Wolne składniki są wypłukiwane.Do każdego dołka dodaje się roztwór substratu TMB.Tylko te dołki, które zawierają przeciwciało 8-OHdG sprzężone z 8-OHdG i HRP będą miały kolor niebieski, a następnie zmienią kolor na żółty po dodaniu roztworu zatrzymującego reakcję.Gęstość optyczną (OD) mierzy się spektrofotometrycznie przy długości fali 450 nm.Wartość OD jest proporcjonalna do stężenia 8-OHdG.Stężenie 8-OHdG w próbkach można obliczyć porównując OD próbek z krzywą standardową.
Materiały dostarczone z zestawem
Materiały dostarczone z zestawem | 48 oznaczeń | 96 oznaczeń | Magazynowanie | |
1 | Instrukcja obsługi | 1 | 1 | RT |
2 | Membrana płyty zamykającej | 2 | 2 | RT |
3 | Zapieczętowane torby | 1 | 1 | RT |
4 | Płytka do usuwania mikroelizy | 1 | 1 | 2-8 ℃ |
5 | Standardowo 1350 pg/ml | 0,5 ml × 1 butelka | 0,5 ml × 1 butelka | 2-8 ℃ |
6 | Rozcieńczalnik standardowy | 1,5 ml × 1 butelka | 1,5 ml × 1 butelka | 2-8 ℃ |
7 | Odczynnik koniugatu HRP | 3 ml × 1 butelka | 6 ml × 1 butelka | 2-8 ℃ |
8 | Rozcieńczalnik próbki | 3 ml × 1 butelka | 6 ml × 1 butelka | 2-8 ℃ |
9 | Roztwór chromogenu A | 3 ml × 1 butelka | 6 ml × 1 butelka | 2-8 ℃ |
10 | Roztwór chromogenu B | 3 ml × 1 butelka | 6 ml × 1 butelka | 2-8 ℃ |
11 | Zatrzymaj rozwiązanie | 3 ml × 1 butelka | 6 ml × 1 butelka | 2-8 ℃ |
12 | Roztwór myjący | 20 ml (20X) × 1 butelka | 20 ml (30X) × 1 butelka | 2-8 ℃ |
Dziesięć studzienek jest ustawionych na standardy w płytce paskowej Microelisa.W studzience 1 i studzience 2 dodaje się 100 μl roztworu standardowego i 50 μl buforu rozcieńczenia standardowego i dobrze miesza.W studzience 3 i studzience 4 dodaje się odpowiednio 100 μl roztworu ze studzienki 1 i studzienki 2.Następnie dodaje się 50 μl buforu do rozcieńczeń standardowych i dobrze miesza.50 μl roztworu odrzucono z dołka 3 i dołka 4. Do dołka 5 i dołka 6 dodano odpowiednio 50 μl roztworu z dołka 3 i dołka 4.Następnie dodaje się 50 μl buforu do rozcieńczeń standardowych i dobrze miesza.Do dołka 7 i dołka 8 dodaje się odpowiednio 50 μl roztworu z dołka 5 i dołka 6.Następnie dodaje się 50 μl buforu do rozcieńczeń standardowych i dobrze miesza.W studzience 9 i studzience 10 dodaje się odpowiednio 50 μl roztworu ze studzienki 7 i studzienki 8.Następnie dodaje się 50 μl buforu do rozcieńczeń standardowych i dobrze miesza.50 μl roztworu usuwa się ze studzienek 9 i 10. Po rozcieńczeniu całkowita objętość we wszystkich studzienkach wynosi 50 μl, a stężenia wynoszą 900 pg/ml, 600 pg/ml, 300 pg/ml, 150 pg/ml i 75 pg/ml , odpowiednio.
Obliczanie wyników
Znane stężenia mysiego standardu 8-OHdG i odpowiadające mu odczyty OD wykreślono odpowiednio na skali logarytmicznej (oś x) i skali logarytmicznej (oś y).Stężenie mysiego 8-OHdG w próbce określa się przez wykreślenie OD próbki na osi Y.Pierwotne stężenie oblicza się mnożąc współczynnik rozcieńczenia.
Precyzja
Precyzja wewnątrztestowa (Precyzja w ramach testu): 3 próbki z niskim, średnim i wysokim poziomem mysiego 8-OHdG przetestowano 20 razy odpowiednio na jednej płytce.
Precyzja między testami (precyzja między testami): 3 próbki z niskim, średnim i wysokim poziomem mysiego 8-OHdG testowano na 3 różnych płytkach, po 8 powtórzeń na każdej płytce.
CV(%) = SD/średnia X100
Wewnątrz testu: CV<10%
Między testami: CV<12%
Zakres testu
15 pg/ml- 1000 pg/ml
Wrażliwość:
4,5 pg/ml
Osoba kontaktowa: Mr. Steven
Tel: +8618600464506