Zestaw testowy Sandwich Elisa VD3 RUO Zestaw witaminy D3 Elisa do użytku badawczego

Ludzka witamina D3; zestaw VD3 ELISA

• Data ważności: sześć miesięcy.
• Przechowywanie: 2-8 ℃.
• Nasz zestaw Human Vitamin D3 (VD3) ELISA służy do oznaczania poziomu witaminy D3 (VD3) w ludzkiej surowicy, osoczu, pożywkach hodowlanych lub dowolnym płynie biologicznym.

Zasada

  Ten zestaw ELISA wykorzystuje metodę Sandwich-ELISA.Dostarczona w tym zestawie płytka Microelisa została wstępnie pokryta przeciwciałem specyficznym dla witaminy D3 (VD3).Standardy lub próbki są dodawane do odpowiednich studzienek płytki Microelisa i łączone ze specyficznym przeciwciałem.Następnie do każdej studzienki płytki Microelisa dodaje się sprzężone z peroksydazą chrzanową (HRP) przeciwciało specyficzne dla witaminy D3 (VD3) i inkubuje.Wolne składniki są wypłukiwane.Do każdego dołka dodaje się roztwór substratu TMB.Tylko te dołki, które zawierają witaminę D3 (VD3) i przeciwciało witaminy D3 (VD3) sprzężone z HRP, będą miały kolor niebieski, a następnie zmienią kolor na żółty po dodaniu roztworu zatrzymującego.Gęstość optyczną (OD) mierzy się spektrofotometrycznie przy długości fali 450 nm.Wartość OD jest proporcjonalna do stężenia witaminy D3 (VD3).Możesz obliczyć stężenie witaminy D3 (VD3) w próbkach, porównując OD próbek z krzywą standardową.

Materiały dostarczone z zestawem

• Rozcieńczenie standardów

Dziesięć studzienek jest ustawionych na standardy w płytce paskowej Microelisa.W studzience 1 i studzience 2 dodaje się 100 μl roztworu standardowego i 50 μl buforu rozcieńczenia standardowego i dobrze miesza.W studzience 3 i studzience 4 dodaje się odpowiednio 100 μl roztworu ze studzienki 1 i studzienki 2.Następnie dodaje się 50 μl buforu do rozcieńczeń standardowych i dobrze miesza.50 μl roztworu odrzucono z dołka 3 i dołka 4. Do dołka 5 i dołka 6 dodano odpowiednio 50 μl roztworu z dołka 3 i dołka 4.Następnie dodaje się 50 μl buforu do rozcieńczeń standardowych i dobrze miesza.Do dołka 7 i dołka 8 dodaje się odpowiednio 50 μl roztworu z dołka 5 i dołka 6.Następnie dodaje się 50 μl buforu do rozcieńczeń standardowych i dobrze miesza.W studzience 9 i studzience 10 dodaje się odpowiednio 50 μl roztworu ze studzienki 7 i studzienki 8.Następnie dodaje się 50 μl buforu do rozcieńczeń standardowych i dobrze miesza.50 μl roztworu usuwa się ze studzienek 9 i 10. Po rozcieńczeniu całkowita objętość we wszystkich studzienkach wynosi 50 μl, a stężenia wynoszą 30 ng/ml, 20 ng/ml, 10 ng/ml, 5 ng/ml i 2,5 ng/ ml, odpowiednio.

Obliczanie wyników

Znane stężenia wzorca ludzkiej witaminy D3 (VD3) i odpowiadający mu odczyt OD wykreślono odpowiednio na skali logarytmicznej (oś x) i skali logarytmicznej (oś y).Stężenie ludzkiej witaminy D3 (VD3) w próbce określa się przez wykreślenie OD próbki na osi Y.Pierwotne stężenie oblicza się mnożąc współczynnik rozcieńczenia.

Precyzja

Precyzja wewnątrztestowa (precyzja w ramach testu): 3 próbki o niskim, średnim i wysokim poziomie ludzkiej witaminy D3 (VD3) zostały przetestowane 20 razy na jednej płytce, odpowiednio.

Precyzja między testami (precyzja między testami): 3 próbki z niskim, średnim i wysokim poziomem ludzkiej witaminy D3 (VD3) zbadano na 3 różnych płytkach, po 8 powtórzeń na każdej płytce.

CV(%) = SD/średnia X100

Wewnątrz testu: CV<10%

Między testami: CV<12%

Zakres testu

0,8 ng/ml -36 ng/ml

Wrażliwość:

0,3 ng/ml

• Po otrzymaniu zestaw należy przechowywać w temperaturze 4°C. Przed wykonaniem testu zestaw należy doprowadzić do temperatury pokojowej.Usuń wszystkie niepotrzebne paski z płytki pokrytej przeciwciałami ludzkiej witaminy D3 (VD3), zamknij je ponownie folią i trzymaj w temperaturze 4°C.
• W każdym teście należy uwzględnić krzywą standardową.Zaleca się powielenie studzienek.Jeśli wartość OD próbki jest większa niż pierwsza studzienka standardów, przed testem należy rozcieńczyć próbkę (n razy).Obliczając pierwotne stężenie witaminy D3 (VD3), należy pomnożyć całkowity współczynnik rozcieńczenia (XnX5).