Ludzka ferrytyna, zestaw FE ELISA
Materiały dostarczone z zestawem
| |
Materiały dostarczone z zestawem |
48 oznaczeń |
96 oznaczeń |
Magazynowanie |
| 1 |
Instrukcja obsługi |
1 |
1 |
RT |
| 2 |
Membrana płyty zamykającej |
2 |
2 |
RT |
| 3 |
Zapieczętowane torby |
1 |
1 |
RT |
| 4 |
Płytka do usuwania mikroelizy |
1 |
1 |
2-8 ℃ |
| 5 |
Standardowo: 36ng/ml |
0,5 ml × 1 butelka |
0,5 ml × 1 butelka |
2-8 ℃ |
| 6 |
Rozcieńczalnik standardowy |
1,5 ml × 1 butelka |
1,5 ml × 1 butelka |
2-8 ℃ |
| 7 |
Odczynnik koniugatu HRP |
3 ml × 1 butelka |
6 ml × 1 butelka |
2-8 ℃ |
| 8 |
Rozcieńczalnik próbki |
3 ml × 1 butelka |
6 ml × 1 butelka |
2-8 ℃ |
| 9 |
Roztwór chromogenu A |
3 ml × 1 butelka |
6 ml × 1 butelka |
2-8 ℃ |
| 10 |
Roztwór chromogenu B |
3 ml × 1 butelka |
6 ml × 1 butelka |
2-8 ℃ |
| 11 |
Zatrzymaj rozwiązanie |
3 ml × 1 butelka |
6 ml × 1 butelka |
2-8 ℃ |
| 12 |
Roztwór myjący |
20 ml (20X) × 1 butelka |
20 ml (30X) × 1 butelka |
2-8 ℃ |
Procedura
Rozcieńczenie standardów
1.Dziesięć dołków jest ustawionych na standardy w płytce do pasków Microelisa.W studzience 1 i studzience 2 dodaje się 100 μl roztworu standardowego i 50 μl buforu rozcieńczenia standardowego i dobrze miesza.W studzience 3 i studzience 4 dodaje się odpowiednio 100 μl roztworu ze studzienki 1 i studzienki 2.Następnie dodaje się 50 μl buforu do rozcieńczeń standardowych i dobrze miesza.50 μl roztworu odrzucono z dołka 3 i dołka 4. Do dołka 5 i dołka 6 dodano odpowiednio 50 μl roztworu z dołka 3 i dołka 4.Następnie dodaje się 50 μl buforu do rozcieńczeń standardowych i dobrze miesza.Do dołka 7 i dołka 8 dodaje się odpowiednio 50 μl roztworu z dołka 5 i dołka 6.Następnie dodaje się 50 μl buforu do rozcieńczeń standardowych i dobrze miesza.W studzience 9 i studzience 10 dodaje się odpowiednio 50 μl roztworu ze studzienki 7 i studzienki 8.Następnie dodaje się 50 μl buforu do rozcieńczeń standardowych i dobrze miesza.50 μl roztworu usuwa się ze studzienek 9 i 10. Po rozcieńczeniu całkowita objętość we wszystkich studzienkach wynosi 50 μl, a stężenia wynoszą odpowiednio 24 ng/ml, 16 ng/ml, 8 ng/ml, 4 ng/ml i 2 ng/ml .
2. W płytce testowej Microelisa pozostawić pusty dołek jako kontrolę ślepą.Do dołków na próbki dodaje się 40 μl buforu rozcieńczającego próbki i 10 μl próbki (współczynnik rozcieńczenia wynosi 5).Próbki należy umieszczać na dnie bez dotykania ścianki studzienki.Dobrze wymieszaj, delikatnie wstrząsając.
3. Inkubacja: inkubuj 30 min w 37 ℃ po uszczelnieniu membraną do płytki zamykającej.
4. Rozcieńczanie: rozcieńczyć stężony bufor do płukania wodą destylowaną (30 razy dla 96T i 20 razy dla 48T).
5. Mycie: ostrożnie odkleić membranę płytki zamykającej, zaaspirować i ponownie napełnić roztworem myjącym.Wyrzucić roztwór myjący po 30 sekundach odpoczynku.Powtórz procedurę mycia 5 razy.
6. Dodaj 50 μl odczynnika HRP-Conjugate do każdego dołka z wyjątkiem ślepego dołka kontrolnego.
7. Inkubacja zgodnie z opisem w kroku 3.
8. Pranie zgodnie z opisem w kroku 5.
9. Zabarwienie: Dodaj 50 μl roztworu chromogenu A i 50 μl roztworu chromogenu B do każdego dołka, wymieszaj delikatnie wstrząsając i inkubuj w temperaturze 37℃ przez 15 minut.Proszę unikać światła podczas barwienia.
10. Zakończenie: dodaj 50 μl roztworu zatrzymującego reakcję do każdego dołka, aby zakończyć reakcję.Kolor w dołku powinien zmienić się z niebieskiego na żółty.
11. Odczytaj absorbancję OD przy 450 nm za pomocą czytnika płytek Microtiter Plate Reader.Wartość OD ślepej studzienki kontrolnej jest ustawiona na zero.Test należy przeprowadzić w ciągu 15 minut po dodaniu roztworu zatrzymującego.
Precyzja
Precyzja wewnątrztestowa (Precyzja w ramach testu): 3 próbki o niskim, średnim i wysokim poziomie ludzkiej ferrytyny (FE) testowano 20 razy na jednej płytce, odpowiednio.
Precyzja między testami (precyzja między testami): 3 próbki o niskim, średnim i wysokim poziomie ludzkiej ferrytyny (FE) testowano na 3 różnych płytkach, po 8 powtórzeń na każdej płytce.
CV(%) = SD/średnia X100
Wewnątrz testu: CV<10%
Między testami: CV<12%
Zakres testu
0,4ng/ml-25ng/ml
Twoja wiadomość musi mieć od 20 do 3000 znaków!
