Zestaw testowy kinazy kreatynowej szczura Izoenzym MB CK-MB ELISA RUO

Izoenzym MB kinazy kreatynowej szczura; CK-MB ELISA Kit

• Do ilościowego oznaczania in vitro stężeń izoenzymu MB szczurzej kinazy kreatynowej (CK-MB) w szczurzej surowicy, osoczu, pożywce hodowlanej lub dowolnym płynie biologicznym.

Zasada

  Ten zestaw ELISA wykorzystuje metodę Sandwich-ELISA.Dostarczona w tym zestawie płytka Microelisa została wstępnie pokryta przeciwciałem swoistym dla wzorców izoenzymu kinazy kreatynowej MB (CK-MB) lub próbki są dodawane do odpowiednich dołków płytki Microelisa i łączone ze swoistym przeciwciałem.Następnie do każdej studzienki płytki Microelisa dodaje się sprzężone z peroksydazą chrzanową (HRP) przeciwciało specyficzne dla izoenzymu MB kinazy kreatynowej (CK-MB) i inkubuje.Wolne składniki są wypłukiwane.Do każdego dołka dodaje się roztwór substratu TMB.Tylko te dołki, które zawierają przeciwciało przeciwko izoenzymowi MB kinazy kreatynowej (CK-MB) i HRP skoniugowanemu z izoenzymem MB kinazy kreatynowej (CK-MB) będą miały kolor niebieski, a następnie zmienią kolor na żółty po dodaniu roztworu zatrzymującego reakcję.Gęstość optyczną (OD) mierzy się spektrofotometrycznie przy długości fali 450 nm.Wartość OD jest proporcjonalna do stężenia izoenzymu MB kinazy kreatynowej (CK-MB).Stężenie izoenzymu kinazy kreatynowej MB (CK-MB) w próbkach można obliczyć porównując OD próbek z krzywą standardową.

Materiały dostarczone z zestawem

• Rozcieńczenie standardów

Dziesięć studzienek jest ustawionych na standardy w płytce paskowej Microelisa.W studzience 1 i studzience 2 dodaje się 100 μl roztworu standardowego i 50 μl buforu rozcieńczenia standardowego i dobrze miesza.W studzience 3 i studzience 4 dodaje się odpowiednio 100 μl roztworu ze studzienki 1 i studzienki 2.Następnie dodaje się 50 μl buforu do rozcieńczeń standardowych i dobrze miesza.50 μl roztworu odrzucono z dołka 3 i dołka 4. Do dołka 5 i dołka 6 dodano odpowiednio 50 μl roztworu z dołka 3 i dołka 4.Następnie dodaje się 50 μl buforu do rozcieńczeń standardowych i dobrze miesza.Do dołka 7 i dołka 8 dodaje się odpowiednio 50 μl roztworu z dołka 5 i dołka 6.Następnie dodaje się 50 μl buforu do rozcieńczeń standardowych i dobrze miesza.W studzience 9 i studzience 10 dodaje się odpowiednio 50 μl roztworu ze studzienki 7 i studzienki 8.Następnie dodaje się 50 μl buforu do rozcieńczeń standardowych i dobrze miesza.50 μl roztworu usuwa się ze studzienek 9 i 10. Po rozcieńczeniu całkowita objętość we wszystkich studzienkach wynosi 50 μl, a stężenia wynoszą odpowiednio 15 ng/ml, 10 ng/ml, 5 ng/ml, 2,5 ng/m i 1,25 ng/ml .

Obliczanie wyników

Znane stężenia wzorca izoenzymu MB szczurzej kinazy kreatynowej (CK-MB) i odpowiadający mu odczyt OD wykreślono odpowiednio na skali logarytmicznej (oś x) i skali logarytmicznej (oś y).Stężenie izoenzymu MB szczurzej kinazy kreatynowej (CK-MB) w próbce określa się przez wykreślenie OD próbki na osi Y.Pierwotne stężenie oblicza się mnożąc współczynnik rozcieńczenia.

Precyzja

Precyzja wewnątrztestowa (Precyzja w ramach testu): 3 próbki z niskim, średnim i wysokim poziomem izoenzymu MB kinazy kreatynowej szczura (CK-MB) zbadano 20 razy na jednej płytce, odpowiednio.

Precyzja między testami (precyzja między testami): 3 próbki z niskim, średnim i wysokim poziomem izoenzymu MB kinazy kreatynowej Rt (CK-MB) testowano na 3 różnych płytkach, po 8 powtórzeń na każdej płytce.

CV(%) = SD/średnia X100

Wewnątrz testu: CV<10%

Między testami: CV<12%

Zakres testu

0,28 ng/ml - 18 ng/ml

Wrażliwość:

0,04 ng/ml