Celem:
Zestaw ten umożliwia określenie stężenia TLR4 w surowicy ludzkiej.
Zasada badania
Zestaw bada poziom ludzkiego TLR4 w próbce, użyć oczyszczonego ludzkiego przeciwciała TLR4 do pokrycia mikrotytrowych płytek, zrobić przeciwciało w fazie stałej, a następnie dodać TLR4 do studni,Zespolone przeciwciało TLR4 oznaczone HRP, staje się kompleksem przeciwciała - antygenu - enzymu - przeciwciała, po umyciu całkowicie, dodaj roztwór podłoża TMB, podłoże TMB staje się niebieskiego koloru w HRP katalizowane enzymem,Reakcja kończy się dodaniem roztworu kwasu siarkowego i zmiana koloru jest mierzona spektralnie na długości fali 450 nmNastępnie stężenie ludzkiego TLR4 w próbkach określa się poprzez porównanie nadmiernej dawki w próbkach ze standardową krzywą.
Parametry techniczne:
| Nazwa produktu: |
Human TLR4 RUO ELISA Assay Kit |
| Kraj pochodzenia: |
Chiny |
| Rodzaj próbki: |
Serum, plazma |
| Próbka: |
Serum 50 μl |
| Temperatura przechowywania: |
2-8°C |
| Okres trwałości: |
6 miesięcy |
| Wrażliwość: |
Wysoki |
| Czas oceny: |
1 godzina |
| Wielkość zestawu: |
96 Badania |
| Zastosowanie: |
Diagnoza medyczna |
Materiały dostarczane z zestawem:
| 1 |
roztwór do prania |
20 ml × 1 butelka |
7 |
Zatrzymać rozwiązanie |
6 ml × 1 butelka |
| 2 |
Odczynnik konjugacji HRP |
6 ml × 1 butelka |
8 |
Standardowe ((32 ng/mL) |
0.5 ml × 1 butelka |
| 3 |
Mikroelizowe paski |
Dwanaście razy osiem pasków |
9 |
Standardowy rozcieńczalnik |
1.5 ml × 1 butelka |
| 4 |
Rozcieńczalnik próbki |
6 ml × 1 butelka |
10 |
Instrukcja |
1 |
| 5 |
Roztwór chromogenu A |
6 ml × 1 butelka |
11 |
Membrana płyty zamknięcia |
2 |
| 6 |
Roztwór chromogenu B |
6 ml × 1 butelka |
12 |
Zapełnione torbami |
1 |
|
Wymogi dotyczące próbek
- W przypadku, gdy nie jest to możliwe, należy przeprowadzić eksperymenty w miarę możliwości po pobraniu próbki.próbkę można przechowywać w temperaturze -20 °C w celu zachowaniaUnikać powtarzających się cykli zamrażania i roztopiania.
- Nie można wykryć próbki zawierającej NaN3, ponieważ NaN3 hamuje aktywność HRP.
Procedura oceny
- Rozcieńczenie i dodanie próbki:Rozcieńczenie Pierwotna gęstość Standardowa zgodnie z poniższą tabelą:
| 16 ng/mL |
5 Standardy |
150μl Gęstość pierwotna Standardowy+150μl Standardowy rozcieńczalnik |
| 8 ng/mL |
4 Standardy |
150 μl 5 Standardowy+150 μl Standardowy rozcieńczalnik |
| 4 ng/mL |
3 Standardy |
150 μl 4 Standardowy+150 μl Standardowy rozcieńczalnik |
| 2 ng/mL |
2 Standardy |
150 μl 3 Standardowy + 150 μl Standardowy rozcieńczalnik |
| 1 ng/mL |
1 Norma |
150 μl 2 Standardowy + 150 μl Standardowy rozcieńczalnik |
|
2. Dodawanie próbki:Ustawić próby w próbie próby oddzielnie (w próbie próby próby w próbie próby próby nie dodaje się próby i reagentu HRP-Conjugate, inaczej każda operacja jest taka sama).Dodać 50 μl standardowego do Microelisa stripplate, dodaj rozcieńczenie próbki 40μl do studni próbki badawczej, następnie dodaj próbkę badawczą 10μl (ostatnia rozcieńczenie próbki wynosi 5-krotność), dodaj próbkę do studni, nie dotykaj ściany studni w miarę możliwości i delikatnie mieszaj.
3. Inkubacja: po zamknięciu płytki membranową, inkubacja trwa 30 min w temperaturze 37°C.
4. Konfigurować płyn: 30- lub 20-krotny roztwór do prania rozcieńczony 30- lub 20-krotnie wodą destylowaną i rezerwą.
5. Mycie: Odkryć membrany płytki zamknięcia, wyrzucić płyn, wysuszyć za pomocą huśtawki, dodać bufor do każdej studni, pozostać na 30 sekund, a następnie wylać, powtórzyć 5 razy, wysuszyć za pomocą pat.
6Dodawanie enzymu: dodaje się 50 μl odczynnika HRP-Conjugate do każdej studni, z wyjątkiem studni pustej.
7Inkubacja: operacja z 3.
8- Mycie: operacja z 5.
9.Kolor: Dodać roztwór chromogenu A 50ul i roztwór chromogenu B 50ul do każdej studni, unikać zachowania światła przez 10 min w temperaturze 37°C
10.Zatrzymać reakcję:dodaj 50 μl roztworu Stop do każdej studni, zatrzymaj reakcję ((niebieski kolor zmienia się na żółty).
11.Analiza: po odczytaniu absorbancji w temperaturze 450 nm po dodaniu roztworu stop i w ciągu 15 min.
Oblicz
Weź standardową gęstość jako poziomą, wartość OD dla pionowej, narysować standardową krzywą na papierze graficznym,Wyznacz odpowiednią gęstość według wartości próbki OD poprzez krzywą próbki, pomnożone przez wielokrotność rozcieńczenia lub obliczyć równanie regresji w linii prostej krzywej standardowej z gęstością standardową i wartością OD,z wartością OD próbki w równaniu,obliczyć gęstość próbki, pomnożone przez współczynnik rozcieńczania, wynik stanowi rzeczywistą gęstość próbki.
Twoja wiadomość musi mieć od 20 do 3000 znaków!
