Zestaw badawczy IRISIN ELISA dla ludzi

Celem zastosowania

Zestaw ten umożliwia określenie stężenia iryziny w surowicy ludzkiej, osoczu i innych płynach biologicznych.

Procedura oceny

1Rozcieńczenie i dodanie próbki:Rozcieńczenie Pierwotna gęstość Standardowa zgodnie z poniższą tabelą:

2.dodawanie próbki: Ustawić próby próby w próbie próby oddzielnie (w próbach próby próby próby próby próby próby próby próby próby próby próby próby próby próby próby próby próby próby próby próby próby)Dodać 50 μl standardowego do Microelisa stripplateDodać rozcieńczenie próbki 40μl do studni próbki badawczej, następnie dodać próbkę badawczą 10μl (ostatnia rozcieńczenie próbki wynosi 5-krotność), dodać próbkę do studni, nie dotykać ściany studni tak daleko, jak to możliwe, i delikatnie zmieszać.

3.Inkubacja: Po zamknięciu płyty membranową, inkubacja trwa 30 min w temperaturze 37°C.

4.Konfigurować płyn: 30- lub 20-krotny roztwór do mycia, rozcieńczony 30- lub 20-krotnie wodą destylowaną i rezerwą.

5.prania: Odkrycie membrany płytki zamknięcia, wyrzucenie płynu, suszenie za pomocą huśtawki, dodanie buforu do każdej studni, pozostawienie na 30 sekund, następnie odprowadzanie, powtórzenie 5 razy, suszenie za pomocą pat.

6.dodać enzym:dodać 50 μl odczynnika HRP-Conjugate do każdej studni, z wyjątkiem studni pustej.

7. Inkubacja: Operacja z 3.

8.prania: operacja z 5.

9.kolor:dodać roztwór chromogenu A 50ul i roztwór chromogenu B 50ul do każdej studni, unikać zachowania światła przez 10 min w temperaturze 37°C

10.Zatrzymać reakcję:dodaj 50 μl roztworu Stop do każdej studni, zatrzymaj reakcję ((niebieski kolor zmienia się na żółty).

11. badanie: wziąć pustą studnię na poziomie zerowym, odczytać absorbancję w temperaturze 450 nm po dodaniu roztworu stop i w ciągu 15 min.

Wymogi dotyczące próbek

1.wyciągać jak najszybciej po pobraniu próbki i zgodnie z odpowiednią literaturą, a eksperyment powinien być przeprowadzany jak najszybciej po wyciągnięciu.próbkę można przechowywać w temperaturze -20 °C w celu zachowaniaUnikać powtarzających się cykli zamrażania i roztopiania.

2Nie można wykryć próbki zawierającej NaN3, ponieważ NaN3 hamuje aktywność HRP.

3.wyciągać jak najszybciej po pobraniu próbki i zgodnie z odpowiednią literaturą, a eksperyment powinien być przeprowadzany jak najszybciej po wyciągnięciu.próbkę można przechowywać w temperaturze -20 °C w celu zachowaniaUnikać powtarzających się cykli zamrażania i roztopiania.

4Nie można wykryć próbki zawierającej NaN3, ponieważ NaN3 hamuje aktywność HRP.

Ważne uwagi

• Zestaw należy wyjąć z chłodnicy i ustawić 15-30 minut w temperaturze pokojowej, a płytki ELISA pokryte powłoką, jeśli nie zostały zużyte po otwarciu.Płytka powinna być przechowywana w zamkniętym worku.
• W tym przypadku, gdy woda jest rozpuszczalna, mycie nie ma wpływu na wynik.
• Dodaj próbkę z próbkarzem Każdy krok, i często koryguj jego dokładność, unikając błędu eksperymentalnego. Dodaj próbkę w ciągu 5 min, jeśli liczba próbek jest duża, zalecamy użycie Volley.
• jeżeli zawartość materiału badanego jest zbyt wysoka (odpowiednia dawka próby jest większa niż pierwsza standardowa studnia ),prosimy rozcieńczyć próbkę (n razy), rozcieńczyć i pomnożyć przez współczynnik rozcieńczenia.(×n×5).
• Membrana płyty zamknięcia ogranicza tylko jednorazowe użycie, aby uniknąć skażenia krzyżowego.
• Substrat unika ochrony światła.
• W celu określenia wyników badań należy zastosować czytnik płytek mikrotytrowych jako standard.
• Wszystkie próbki, bufor do prania i każdy rodzaj odrzutów powinny być stosowane zgodnie z procesem wdrażania materiału zakaźnego.
• Nie mieszać odczynników z odczynnikami z innych partii.